根据我国相关法律法规的明确规定，大型客车在凌晨2时至5时期间被严格禁止上路行驶。
具体而言，在夜间的道路环境下（包括高速公路和混合道路），所有行驶中的客运车辆都必须在凌晨2时至5时之间选择最近的安全地点停车并进行休息，同时要求驾驶员务必提醒车上的乘客在此期间内不要随意走动，妥善保管好自己的随身物品，如果有任何需要，应随时与驾驶员取得联系。

《道路旅客运输企业安全管理规范》
第四十五条，道路旅客运输企业在安排运输任务时应当严格要求客运驾驶人在24小时内累计驾驶时间不得超过8小时（特殊情况下可延长2小时，但每月延长的总时间不超过36小时），连续驾驶时间不得超过4小时，每次停车休息时间不少于20分钟。
对于单程运行里程超过400公里（高速公路直达客运600公里）的客运车辆，企业应当配备两名以上客运驾驶人。对于超长线路运行的客运车辆，企业要积极探索接驳运输的方式，创造条件，保证客运驾驶人停车换人、落地休息。对于长途卧铺客车，企业要合理安排班次，尽量减少夜间运行时间。