在经过长达两年的分居生活之后，若需要提起离婚诉讼，仍然需要按照相关规定遵守离婚冷静期的限制。
此项规定的设立初衷在于提供给夫妇们更多时间供其深思熟虑并尝试修复婚姻关系。
然而，值得注意的是，分居两年的事实可被视为夫妻情感破裂的重要证据之一。

《中华人民共和国民法典》第一千零七十七条
自婚姻登记机关收到离婚登记申请之日起三十日内，任何一方不愿意离婚的，可以向婚姻登记机关撤回离婚登记申请。
前款规定期限届满后三十日内，双方应当亲自到婚姻登记机关申请发给离婚证；未申请的，视为撤回离婚登记申请。